分光光度计在公安刑侦实验室中被广泛应用,可以帮助进行检材同一性鉴定、有机物结构的确定、检材纯度的鉴定等工作。通过该仪器可以确定物质的组成成分,为侦查工作提供线索和证据。在工业和民生领域,可见分光光度计也发挥着重要作用,例如对海水、湖水、地下水中的元素分析,重金属检测,土壤中元素的测定,还可以用于食品中的各种成分检测。
可见分光光度计的工作原理是基于分光光度法,该方法通过测定被测物质在特定波长处光的吸收度,实现对物质的定性和定量分析。不同物质具有各自的吸收光谱,根据Lamber-Beer定律,透明溶液介质会吸收部分入射光,被吸收的光能量与浓度成正比。通过分光光度计可以基于这一原理进行成分分析。
在使用分光光度计时,基础操作步骤包括:
1. 预热:仪器需预热30分钟左右才可工作。
2. 调整波长:使用波长旋钮来调整波长,读数时注意垂直观察。
3. 灵敏度调整:选择合适的灵敏度档位固定在某一档位。
4. 调零:通过调节零位来校正仪器的基本读数标尺。
5. 背景校准:放入空白样品进行100%T校准。
6. 测定:轻轻拉动比色皿座架拉杆,进行测定并读数。
最后,在使用分光光度计后及时关闭仪器,清洁比色皿和仪器。维护时应定期除尘、清洁,避免强光照射或受潮。在不使用时应关闭光源灯,保持仪器干燥。对于光路的校准,最好由专业维修工程师进行。
用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。 截止阀 可在600nm测定细菌细胞密度。 (2)紫外可见分光光度计紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。 可以测定核酸和蛋白的浓度,涡街流量计也可以测定细菌细胞密度。 紫外分光光度计又可分为单光束,假双光束,双光束。 它们的用途又有区别。 单光束:适于在给定波长处测量吸光度或透光度,一般不能作全波段光谱扫描,要求光源和检测器具有很高的稳定性。 双光束:自动记录,快速全波段扫描。 可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,特别适合于结构分析。 仪器复杂,价格较高。 假双光束也就是比例双光束,它的原理是由同一单色器发出的光被分成两束,一束直接到达检测器,另一束通过样品后到达另一个检测器。 电热带这种仪器的优点是可以监测光源变化带来的误差,但是并不能消除参比造成的影响。 (3)红外分光光度计一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱,这是研究有机化合物最常用的光谱区域,能分析各种状态(气、液、固)的试样。 红外光谱法的特点是:快速、样品量少(几微克-几毫克),特征性强(各种物质有其特定的红外光谱图)、能分析各种状态(气、液、固)的试样以及不破坏样品。 (4)荧光分光光度计荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。 应用于科研、化工、医药、生化、高压压力泵环保以及临床检验、食品检验、教学实验等领域。 通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。 (5)原子吸收分光光度计该法主要适用样品中微量及痕量组分分析常规仪器之一。 是材料分析及质量控制部门进行常量、微量金属(半金属)元素分析的有力工具。
可见分光光度计的作用,主要是测定有色溶液中测定物质的吸光度。 具体应用是使用在:依据朗伯比尔定律(A=kbc)测定物质的吸光度A值,进行定量的目的。 可见分光光度计是有光源(钨丝灯发出连续光谱)、比色皿(装有色溶液)、单色器(给出单色光)、检测器(读出吸光度值)。
在水和废水监测中的应用,对于一个水系的监测分析和综合评价,一般包括水相(溶液本身)、固相(悬浮物、底质)、生物相(水生生物)。 在水质的常规监测中,紫外可见分光光度法占有较大的比重。 由于水和废水的成分复杂多变,待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大,在具体分析时必须选择好分析方法。 在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等;在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等;在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。
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